液相色譜儀是測量儀器中的一種利用混合物在液固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,后分析鑒定的儀器。液相色譜儀對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實現(xiàn)分離。應(yīng)用于生物化學、生物醫(yī)學、環(huán)境化學、石油化工等部門。液相色譜儀是一種高精密儀器,在日常使用中應(yīng)注意儀器的維護保養(yǎng)工作。下面,小編就液相色譜儀的日常維護保養(yǎng)工作做一個簡單的介紹。
貯液瓶的日常維護
清潔是保持流動相貯液瓶正常使用的關(guān)鍵,使用LCMS級的溶劑和試劑。陳舊的流動相和用久了的試劑應(yīng)定期廢棄,防止生長微生物和組分改變。貯液瓶內(nèi)壁定期清洗,流動相濾頭定期清洗或更換。
液相泵的日常維護
泵的密封圈是最易磨損的部件,密封圈的損壞可能引發(fā)漏液或劇烈壓力波動;單向閥的正常工作至關(guān)重要,它若發(fā)生故障,將直接影響流速的穩(wěn)定性。
日常維護應(yīng)注意以下幾點:
①使用LCMS級的溶劑和試劑;
?、诖_保系統(tǒng)壓力在正常范圍;
?、凼褂猛昃彌_液體系后用純水沖洗干凈,防止鹽沉積,系統(tǒng)不運行時應(yīng)存儲在無緩沖液的溶液或有機溶劑中;
?、苊芊馊Π凑崭鱾€生產(chǎn)廠商的建議定期更換。
進樣器的日常維護
樣品預(yù)處理對于防止進樣針和進樣閥堵塞至關(guān)重要。
預(yù)處理常用方法:
①超濾;
?、谌軇┹腿?去鹽;
③固相萃??;
?、芄嘧艋?去鹽;
?、萆V分離;
?、藜状蓟蛞译娉恋淼鞍祝?/p>
?、咚崴?,酶解;
?、嘌苌?。
進樣閥的維護:
?、龠M樣時,進樣針應(yīng)插到底。
?、诓皇褂脮r將針頭留在進樣器內(nèi)。
?、圻M樣時應(yīng)使用液相色譜專用平頭進樣針。
?、艹S妹芊鈮|的材質(zhì)適用于樣品溶液pH<10,否則換特氟隆材質(zhì)的密封墊pH10-13。
?、萸逑磻?yīng)使用專用針口清洗器。
?、廾刻旆治龉ぷ鹘Y(jié)束后,要用樣品溶液相似溶劑清洗進樣閥中殘留的樣品。
色譜柱的維護和保存
?、倜看喂ぷ鹘Y(jié)束,用高比例強溶劑沖洗色譜柱,沖去留在柱上的強吸附組分;
?、趦艋瘶悠?,樣品中的微粒會進入色譜柱,在柱頭上沉積下來,造成柱壓升高,柱效降低;
?、郾苊庾矒羯V柱,如掉落或超聲震蕩;
?、苤鶋罕苊饧眲∽兓?;
?、莘聪嘀鵆18應(yīng)保存在純有機相或50%有機相中,一周不用要卸下,兩端用堵頭密封,避免干枯。
流動相的選擇
LCMS常用的流動相為甲醇、乙腈、水和它們不同比例的混合物以及一些易揮發(fā)鹽的緩沖液,如甲酸銨、乙酸銨等,還可以加入易揮發(fā)酸堿如甲酸、乙酸或氨水等調(diào)節(jié)pH值;LCMS體系要避免使用含磷或氯的緩沖液,含鈉和鉀的成分必須<1mmol/l。(鹽分太高會抑制離子源的信號和堵塞噴霧針及污染接口)含甲酸(或乙酸)<2%,含三氟乙酸<0.5%,含三乙胺<1%,含醋酸銨<10—5 mmol/l。
樣品的預(yù)處理
從保護儀器角度出發(fā),防止固體小顆粒堵塞進樣管道和噴霧針,防止污染MS,降低分析背景,排除對分析結(jié)果的干擾;從ESI電離得過程分析看,電荷聚集在液滴的表面,樣品和雜質(zhì)在液滴表面相互競爭,不揮發(fā)物(如磷酸鹽等)妨礙帶電液滴揮發(fā),大量雜質(zhì)妨礙帶電樣品離子氣化,增加電荷中和的可能。
(審核編輯: 智匯張瑜)
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